PC12细胞莫名死亡

培养基污染，耗材污染，环境污染，培养箱污染，细胞冻存时污染，人为操作污染，一切都有可能

细胞死亡的原因很多，如培养环境不符合洁净度要求，培养基污染、血清污染、操作不当等都会导致细胞死亡。具体情况要看你具体培养的细胞及实验环境、手法而定。

主要考虑环境、培养条件、PH值、细菌污染等方面问题导致。

pbs多冲洗几次，冲洗完全，减少胰酶的消化时间

可能是由以下几个原因导致的：

细胞传代次数过多：经过多次传代后，细胞容易出现分化和老化现象，导致细胞数量减少。建议您定期更换新的细胞，避免使用过多次传代的细胞。

细胞密度不足：细胞密度不足可能导致细胞死亡。建议您在铺细胞时注意细胞密度的控制，确保细胞密度足够。

细胞质量不稳定：某些细胞系在不同实验室、不同批次、甚至不同时间段的细胞质量可能存在差异，可能是细胞提供者或培养条件等因素导致的。建议您尽量从可靠的供应商购买细胞，并保证细胞培养条件的稳定性。

污染：污染也是导致细胞死亡的原因之一。细菌、真菌、病毒等微生物的污染可能会导致细胞死亡。建议您定期检查培养物中是否存在细菌、真菌、病毒等微生物污染，并采取相应措施进行处理。

储存条件不良：如果细胞储存条件不良，如温度、液氮保管等问题，也可能会导致细胞死亡。建议您妥善保存细胞，按照规定的方法进行储存。

建议您检查一下以上几个方面，找出问题的原因，并针对性地采取相应的措施，以提高细胞培养的质量和稳定性。