PC12细胞的分化

丁香园Ginkgokeer的问题：

未分化的PC12在什么情况下会使它产生分化，从而成为分化的PC12？？是不是NGF有这样的作用？除此以外呢？

丁香园sudajyou的观点：

pc12 在未分化时贴壁生长，但最好用5%HS, 5%FBS/DMEM培养液，据说PC12在完全没有HS的培养液中贴壁不好。我用的是CORNING的培养皿，PC12贴壁很好。

丁香园忘记宝儿兔兔的问题：

关于pc12细胞即鼠嗜铬细胞瘤细胞，它是属于神经细胞吗？分化的和未分化的各有什么用途？培养时候大约需要多少天？

丁香园lixinwuhan的观点：

pc12细胞可以被神经生长因子诱导分化成类神经元细胞，会长出轴突，和神经元细胞的结构和功能类似。未分化的可以用来做NGF的诱导实验等等，已分化的应该可以做神经元细胞相关的检测吧，像免疫组化什么的。培养用1640+10%FCS+5%HS,细胞生长很快，3天左右就要传一代，若要分化的话用NGF诱导分化，具体浓度说法不一，我用100ng/ml诱导成功过，会长出很长的轴突。

关于胎牛血清和马血清的作用有人做过相关研究，指出马血清提供了PC12细胞神经样生长突触所需的重要因子，胎牛血清在PC12细胞培养中对细胞贴壁起着重要的作用，国际通用1640＋10％HS＋5％FCS培养pc12细胞，但我培养过程中觉得2种血清浓度对调一下生长更好，可能是细胞亚型不同吧。

丁香园syschenxiang的问题：

我刚开始养PC12，放到培养皿中很快就贴壁分化，但是能传代。到底传代与分化有何关系？

丁香园yppyar的观点：

PC12细胞生长特性是半贴壁或称半悬浮，有聚集成团生长的特点，贴壁不牢，即使贴壁也不改变细胞的圆球形状，如果细胞贴壁后变成梭形，则意谓着细胞已经长老了，如果传代的话大概一周传一次即可。我不知你所说的分化是什么意思，因为PC12细胞有神经细胞的特性，如果用一些神经生长因子可使其分化成有神经元特征的神经细胞。

丁香园hfy770的问题：

请问有哪位做过用NGF诱导PC12细胞分化的实验吗？能否告知一下具体的方法，如：细胞该用百分之几的血清养，NGF的稀释倍数及用量等

丁香园杨柳飘飘的回答:

将PC12细胞（2×104或2×105）接种于含10%胎牛血清、5%马血清， 100U/ml青霉素、100mg/ml链霉素的DMEM完全培养液（pH7.2）的塑料培养瓶（或培养皿）中。

神经生长因子诱导PC12细胞分化神经纤维：

要求：

（1）细胞密度: 2.5-10×104 cell/cm2

（2）塑料培养皿的包被。

上述细胞培养24小时后，换入含2.5S NGF(50ng/ml)的DMEM完全培养液，以后隔天换液（含NGF）；取NGF分化5-10天后的PC12细胞用于实验。（一般情况下，NGF诱导10-14天时，NGF可使PC12细胞长出神经纤维，并形成致密的网络

丁香园liandchu的问题：

我现在正在做一种神经营养因子的功能,它能促进神经突起的生长,我用的细胞模型是pc12细胞,但pc12 不容易贴壁,我悬浮培养,若它能向神经方面分化,是否可以从悬浮状态转变为贴壁生长?神经细胞不是不容易贴壁吗?

丁香园zhuweiliok的观点：

分化的PC12细胞是很容易贴壁的,并呈现出神经元的形态特点,你应该先搞清楚是用分化的还是未分化的PC12；原代培养的神经元贴壁性差一些,所以要用多聚赖氨酸铺被,不容易贴壁不等于不能贴壁。