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无需程序冻存,细胞可直接置于- 80°C冰箱完成冻存过程;
无血清无蛋白配方,成分明确,不影响细胞的生长和分化潜能及其它高级应用;
冻存步骤[1]
1. 选择处于对数生长期的细胞,按照常用的方法收集细胞于离心管中,按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数(参考数量:5×105 至 5×106cells/mL)。
2. 取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量,置于离心管中,离心收集培养细胞(考离心条件:4℃,250 g,离心3~5 min)。
3. 吸去上清液。
4. 加入适量程序冻存液于离心管中,混合均匀,制成细胞混合液。
5. 将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。
6. 将冻存管直接置于-80℃冰箱中,24 h后移入液氮长期保存。
土井挞克树
可以用dmso的冻存液加入血清。
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对于骨髓间充质干细胞也有人用培养液:血清:DMSO=4;5:1,或者血清:DMSO=9:1.等