还想还想继续
求助各位前辈,想在爬片上做病毒侵袭实验,具体操作是在铺有细胞的爬片中接毒在4℃的条件下孵育1H,弃去病毒悬液,换维持液,然后在37℃培养箱孵育。但是每次从4℃条件下拿出来的时候细胞形态还挺正常,但在37℃孵育箱放一两个小时候,细胞就死了,有什么办法解决吗?
土井挞克树
首先要保证细胞浓度合适,太高太低以及与病毒配比不正常都不合适。
其次,病毒做成PBS稀释梯度比较好,除非你对配比掌握很高,不然都建议做梯度。
再者曾经有同仁温度操作错误,不过这个是小概率事件了。
灵枢天问
有可能是弃病毒悬液的时候没有去除干净,病毒残留过度伤害细胞
汤姆卜丽波
是不是你的细胞密度和你的病毒浓度不符合,导致病毒毒性太强,做个预实验分梯度做一下