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dapi用后背景高

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zgyi698

为什么造成这么高的背景啊?

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4 个回答

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Eason老歌迷

有帮助

如果DAPI背景太高,可能有几个原因。一个是组织切片太厚。二个是封闭不佳,如果背景太强,可以考虑换种封闭液或者增加封闭孵育的时间。三是二抗有非特异性结合。四是抗体浓度太高,降低所使用的抗体浓度或调整孵育时间。五是洗涤不充分,染色有很多步骤,其中又包括很多洗涤的步骤。在实验过程中,确保洗涤到位。

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whilt-shirt

有帮助

有可能是染色剂浓度太高导致的,建议稀释一下再试试

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balalaLy

有帮助

你这个感觉不是dapi的问题,如果dapi浓度高或者曝光过度应该是整个视野差不多的,但你这个只是局部过曝,其它的细胞核还是属于比较淡的染色。而且视野中还有很多小颗粒的蓝染,这种情况比较像是被支原体或者细菌污染了。像石蜡片子保存受潮,时间久了就会这样。

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申东熙老伯

有帮助

可能是染DAPI的时候时间过久,出现了非特异性结合。

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