求助流式测细胞周期，s期成为一个小小钝峰，好像没有g2期

如图（图为mcf-7细胞零给药组），测了几遍都很奇怪，不知道是什么问题，我的操作是这样的

六孔板用无edta的胰酶消化下来，然后1000r离心5min,pbs清洗，移到1.5ml管子里，再离心，然后pbs重悬，涡旋的条件逐滴滴加入预冷的无水乙醇中，至终条件为1ml 75%乙醇，过夜。

第二天1500r离心，满满吸走上清，剩大概一百μ加入pbs至管中，然后离心，再剩一百μ，500μBd-pi重悬

求救大家我这个数据大概率是哪里出了问题，我能怎么改进呢？请大家多帮帮忙！谢谢！