如何用流式区分G2期和M期?
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有丝分裂细胞周期各时相的DNA 含量不同,通常正常细胞的G1/ G0 期具有二倍体细胞的DNA 含量(2N) ,而G2/ M 期具有四倍体细胞的DNA 含量(4N) ,而S 期的DNA含量介于二倍体和四倍体之间。因此,用DNA染料处理细胞后,可以将细胞周期各时相区分为G1/ G0 期,S 期和G2/ M 期,并可通过计算获得各时相的百分率。
M期是细胞周期的重要研究对象,但由于G2期和M期的DNA含量一致,仅用DNA染料无法区分。Larsen等(1984)利用mithramycin结合DNA染料分析多聚甲醛固定的有丝分裂细胞,利用其mithramycin染色和FSC的特性将G2期和M期细胞区分开来。
有丝分裂细胞DNA染色被多聚甲醛淬灭的比间期细胞少,mithramycin的荧光高20~40%,而FSC降低30~60%,该方法与显微镜计数的相关性很高。
下图摘自Mathias, S et al Differential modulation of paclitaxel-mediated apoptosis by p21Waf1 and p27Kip1 Oncogene (2000) 19, 2423 -2429
Mithramycin A
别名:
Mithracin
Aureolic acid
Aurelic acid
Plicamycin
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