显G带法
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原理
常用的显带方法，有操作简便、经济和能长期保存的优点，有关G带显示法在文献中报道极多，但不一定都能重复出满意的效果，可能与各研究室所用材料条件有关，因此引进任何一显带法之前，还要进行预试验。
材料与仪器
标本
磷酸缓冲液 甲醇 Giemsa 胰蛋白酶
磷酸缓冲液 甲醇 Giemsa 胰蛋白酶
步骤
一、胰酶-Giemsa 混合显带法
1. 预处理
最中期染色体标本，置60 ℃~80 ℃温箱中20~30 分钟，或在37 ℃温箱过夜；然后浸入0.025 M磷酸缓冲液中，pH6.8，56 ℃温浴10 分钟（不经此步亦可）；
2. 消化和染色
用现配的胰蛋白酶-Giemsa混合液消化和染色10~30 分钟，混合液按如下比例配制
0.25%胰酶 0.3~0.4 ml
3. 封片
染色后用自来水冲洗（流水冲洗标本背面），入蒸馏水漂洗数次、晾干、二甲苯透明2~3 分钟、封入中性树脂中。
二、Giemsa 显带法
2. 胰酶消化
用0.85 %的NaCl配制0.25 %胰蛋白酶溶液（微孔滤膜无菌滤过）消化3~5 分钟（用滴加在标本上或用染色缸消化均可）；
3. 染色
取出标本片，先直立于吸水纸上除去多余胰酶液后，随即置入Giemsa染液中，染10 分钟；
4. 封片
自来水洗、蒸馏水漂洗、晾干、二甲苯透明2~3 分钟、封入中性树胶中。
1. 预处理
最中期染色体标本，置60 ℃~80 ℃温箱中20~30 分钟，或在37 ℃温箱过夜；然后浸入0.025 M磷酸缓冲液中，pH6.8，56 ℃温浴10 分钟（不经此步亦可）；
2. 消化和染色
用现配的胰蛋白酶-Giemsa混合液消化和染色10~30 分钟，混合液按如下比例配制
0.025 M 磷酸缓冲液pH6.8 73.0 ml
甲醇 27.0 ml
Giemsa干粉 50.0 mg
0.25%胰酶 0.3~0.4 ml
3. 封片
染色后用自来水冲洗（流水冲洗标本背面），入蒸馏水漂洗数次、晾干、二甲苯透明2~3 分钟、封入中性树脂中。
二、Giemsa 显带法
1. 预处理
将标本置入60~80 ℃温箱或烤箱中20~30 分钟；亦可在37 ℃温箱中过夜；
将标本置入60~80 ℃温箱或烤箱中20~30 分钟；亦可在37 ℃温箱中过夜；
2. 胰酶消化
用0.85 %的NaCl配制0.25 %胰蛋白酶溶液（微孔滤膜无菌滤过）消化3~5 分钟（用滴加在标本上或用染色缸消化均可）；
3. 染色
取出标本片，先直立于吸水纸上除去多余胰酶液后，随即置入Giemsa染液中，染10 分钟；
4. 封片
自来水洗、蒸馏水漂洗、晾干、二甲苯透明2~3 分钟、封入中性树胶中。
注意事项
1. 胰酶消化显带过程中，胰酶消化是重要的环节，消化不足带不出现，消化过度，染色体变得膨胀和不着色，必须把握好胰酶浓度和消化持续时间。
2. 预处理或老化是显带过程中另一个重要环节，对消化和染色有很大影响，其中干热处理是较简便易行和效果好的办法。
2. 预处理或老化是显带过程中另一个重要环节，对消化和染色有很大影响，其中干热处理是较简便易行和效果好的办法。
来源：丁香实验
