THP-1细胞复苏困难如何解决？

大概有几个原因，你可以看看是不是你的冻存液加太多了，或者是冻存的量太大了，或者是存在细胞污染，等等

需要排除是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题。

首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。确认下冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，但我们因为这个问题就两种肺癌细胞和一种肝癌细胞专门做过试验，这个是绝大部分人细胞复不活的一个原因。太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。