木子倩影
免疫组化什么表现会出现假阳性结果?
抗体是既往文献中使用过的抗体,纯度应该没问题,染色较深,该分析有无假阳性可能吗
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一般假阳性出现在pbst洗得不够干净,抗体特异性不够好,组织背景高,曝光时间过长等。建议做一张只染igg的isotype以区分是否为假阳性
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有出现假阳性的结果。
染色深可能原因
1.抗体孵育时间过长,抗体浓度高
2.DAB显色时间过长
3.PBST冲洗不充分,残留抗体结果增强着色
4.非特异性组分和抗体结合了
5.染色过程中出现干片。
6.过氧化氢灭活效果不足
小暮
假阳性均系由多种因素造成的非特异着色所致,原因主要有: ①自发荧光或内源酶等干扰; ②抗体试剂不纯(特别是一抗) ;③操作失误,如污染、切片千枯或显色剂操作不当等; ④Fc受体的干扰等。在实验设计实验时应设置阳性对照,如果结果阳性,排除假阴性的可能
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