微柱凝胶法交叉配血假阳性结果的剖析
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[摘要]目的寻找应用微柱凝胶法进行交叉配血出现假阳性结果的原因。方法用微柱凝胶法对本院需要输血的患者进行交叉配血,阳性者再用凝聚胺法及抗球蛋白配血法交叉配血后进行比较。结果2537例配血中检测出假阳性14例占0.55%。结论微柱凝胶法进行交叉配血灵敏度高,自动化程度高,但也容易引起假阳性,给交叉配血造成一定的困扰。
[关键词]微柱凝胶;交叉配血;假阳性
微柱凝胶法是近几年刚传入我国的一种用于抗体筛查、交叉配血的方法,该方法标本用量少,灵敏度高,特异性强,操作简单,结果可较长时间保存[1]。我院检验科用微柱凝胶法对2537例患者进行交叉配血,现将结果分析如下。
1材料和方法
111样本来源所选病例为我院需要输血的2537例患者,供血者为南京市血液中心提供的“小辫子”血。
112试剂微柱凝胶配血卡,专用离心机和孵育箱(瀚通公司);凝聚胺试剂(珠海贝索生物技术有限公司),抗球蛋白试剂(上海血液中心)。
113方法
11311微柱凝胶法标记好cellbind血型卡,主侧:45μL受血者血清加2%供血者红细胞悬液45μL;次侧:45μL供血者血清加2%受血者红细胞悬液45μL,37℃孵育15min后专用离心机离心10min,观察结果,红细胞沉积在凝胶管底部者为阴性,红细胞聚集在凝胶带上部为阳性。
11312凝聚胺介质法主管供者2%红细胞悬液2滴加受者血清2滴,次管受者2%红细胞悬液2滴加供者血清2滴,混匀后加低离子溶液0.7mL,混匀再加凝聚胺溶液2滴,3000r/min离心10s,倒掉上清液,轻摇有凝集,再加悬浮液2滴,凝集在1min内散开为阴性,凝集不散开为阳性。
11313抗球蛋白法主侧管受者血清2滴+5%供者红细胞悬液1滴;次侧管5%受者红细胞悬液1滴+供者血清2滴;阳性对照管5%Rh(D)阳性红细胞悬液1滴+IgG抗-D血清2滴;阴性对照管5%O型试剂红细胞悬液1滴+AB型血清2滴;盐水对照1管5%供者红细胞生理盐水悬液1滴+生理盐水2滴;盐水对照2管5%受者红细胞生理盐水悬液1滴+生理盐水2滴。置37℃水浴致敏1h后盐水洗涤红细胞3次,倾去上清液加最适稀释度抗球蛋白血清1滴,混匀,1000r/min离心1min,主次管都不凝集表示输血无禁忌。
2结果
用微柱凝胶法检测出14例次侧管有凝集,用抗球蛋白法和凝聚胺递质法检测均为阴性,后经输注悬浮红细胞后期观察,无不良反应,确定为假阳性。14例假阳性中因为红细胞悬液浓度过高而引起6例,由于纤维蛋白的影响引起3例,因疾病原因引起4例,因冷凝集素引起1例。