个人是做鸡胚心肌细胞的,手上将近做了有千鸡胚了,之前是在老外拿到的protocol,我们夏天做的时候用冰盒预冷,离心同样4度预冷,操作时最大程度降低细胞代谢活力,成纤维差速45min去除。我的经验是请保证培养基,培养箱处于正常工作状态,你的细胞可能是老化了,说明离体后细胞活力降低了很多,确定你的操作与之前的一样,鸡胚用胰酶消化问题不大,我的心肌细胞同样用胰酶消化,每次37度8min,冰上预冷最后消化完预冷离心,确定操作问题不大,那就详细详细检查培养基,培养箱。原代细胞最好是gibco的血清以及新鲜培养基,国内还没有可以代替的产品!供参考!祝好!