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细胞污染

相关实验:传代细胞培养

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一粒会飞的沙

悬浮细胞复苏后培养2.3天会出现小黑点,在倒置显微镜第四挡可见细菌在活动。采用两次离心,然后加平时双倍量的抗生素,效果不佳。实验用的东西都重新高压灭菌了,培养液也重新过滤了,个人操作也更加注意了,但仍然在复苏后出现细菌,苦恼!!!
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29 个回答

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silentjill

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清理你的液氮罐……液氮罐里是不是同时保存着组织样本?或者有存了很长时间的样本?这些都会污染细胞的!
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刘洪岩

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如果还有细胞的话,就重新复一管吧,用新的血清。不知道你的细胞用不用消化,我曾经遇到过酶污染的情况,找到最后才找出来原因。
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qq2081

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扔啦换新的,不行加点抗生素
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sunny218

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一般这种污染只有扔掉的多,很难完全去除污染的。所以建议直接扔掉,免得浪费人力物力和时间
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strongao123

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如果不是重要的稳转细胞,那么应该好不犹豫的扔掉。即使加药救回来,一则需要花费不少时间,二则需要很长一段时间细胞才能恢复良好状态。在这个过程中,还有极大可能污染其他细胞,得不偿失。所以在细胞状态良好的时候,应多多冻存。
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提交中

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遇到过,估计是真菌
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immunliu

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可以考虑用小鼠腹腔巨噬细胞作为饲养细胞,吞噬掉杂质和少量的污染。
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maoyebo

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之前冻存的细胞可能就污染了,估计怎么抢救都很难消灭哪些小黑点
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apumpkin

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细胞培养如果污染了,建议直接丢了。非正常的细胞就算勉强做出实验也是费时间费钱,没有任何意义。
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jiangzhiysy

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严格无菌操作,保证无菌环境,更换血清培养液,除此之外其他都是歪招,凡是污染细胞都无法挽救,只能勉强实验碰碰运气。
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raulw2003

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大家都说了很多方法了,我记得去以前带的师妹做细胞老是污染,后来我看她操作的时候发现她的手上戴了手链,去掉手链后就没有再污染了。你可以注意一下。
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dlynne914813

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我曾经也遇到这个问题,换了血清就没事了。如果是细菌污染,培养液很快就会变黄了,细菌增殖很快,小黑点有可能是血清里的东西,试试换个血清看看。
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Li姹紫嫣红

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重新复苏细胞试试
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xufengprivate

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支原体污染吧,如果换完培养基等还是有问题,换细胞吧
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一葉秋水

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也有可能是酒精灯灯芯烧完后的炭粉粒进入了培养液中
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朱晓玲

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很可能是真菌污染。

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l2x0918

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会不会环境原因呢?
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肥云团子

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先确定是不是细菌污染。第四档一般是40X物镜,这个倍率下看到的有可能是一些细胞状态不好分泌的杂质,也有些是细胞凋亡后的碎片。这些小黑点会有布朗运动,看上去跟细菌一样会动,区别在于细菌的形态是每个点都几乎一样,而且能看到某些黑点会向某一方向移动较长的距离。碎片一般是在原地振荡。如果用CKX51这类观察用显微镜看不清,会换成镜头更好的IX71,基本上都能清楚分出来。如果确实是细菌污染,就像danielsu同学说的,换批好细胞,换掉培养基。离心是没有用的。而且受到细菌污染的细胞,状态会发生改变,实验做出来的结果不一定真实或者难于重复。特别珍贵的细胞,可以参考细胞培养的一些参考书,上面会有更详细的如何用高浓度抗生素除菌和鉴定的方法。这是个非常耗时耗力耗成本。还不如重新买一株回来。
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远古的早晨

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重新换培养液
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恒星的悲伤

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首先确定是不是细菌污染,假如细菌污染过几天,培养基很明显会污浊,不透亮:2 考虑真菌、支原体、衣原体污染:3 纳米细菌也可以叫超级细菌,也有人称作代谢物,总之不是很明白,这个对细胞生长影响不是很大
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