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科研学霸天团，48小时有问必答

问时空组学中数字化空间蛋白质组检测时，对于标本要求是什么啊？要不要提前加入什么抗体啊？

asswei

样品准备的基本原则1、代表性和一致性原则，2、迅速性原则，3、低温原则。

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问若要反映细胞增殖能力和活力是否可以只绘制生长曲线而不计算克隆生成率

z流沙z

可以，生长曲线反应细胞增殖能力，克隆形成主要反应细胞成瘤能力

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问测定药物对细胞增殖抑制的实验

z流沙z

可以只做其中一个，文献中使用多种方法做实验主要是为了多方面证明，另外一个是体现工作量

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问平滑肌细胞如何激活ras通路，浓度是多少

loveliufudan

平滑肌细胞可以通过多种途径激活Ras通路，其中常见的途径包括：G蛋白偶联受体（GPCR）激活：平滑肌细胞表面的GPCR可以被激活，从而促进Ras通路的激活。例如，肾上腺素和去甲肾上腺素通过作用于平滑肌细胞表面的β-肾上腺素能受体（β-AR），从而激活Ras通路。酪氨酸激酶激活：酪氨酸激酶可以被激活，从而促进Ras通路的激活。例如，一些生长因子（如表皮生长因子，EGF）可以通过结合平滑肌细胞表面的受

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问想构建某疾病的角膜上皮细胞模型，本打算用该病病人的血清培养角膜上皮细胞，可想到角膜是无血液的组织，那这种方法还可行吗？

asswei

培养方法:原代培养 1. 将供体角膜放于消毒过的物品上，上皮面朝上，用手术刀切成 12 个三角形组织片。应一刀切下去，避免锯割。如此仔细处理角膜可减少对胶原蛋白基质的破坏和成纤维细胞的脱落。2. 将角膜组组织片的上皮面翻向下，放入用鼠尾 I 型胶原蛋白预涂的 6 孔培养板，每孔放 4 个组织块。3. 用镊子轻压组织片，以便使组织块与培养皿表面充分接触。将组织片放置 20 min，使其变干。4. 将

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问LDH检测细胞活力，两次检测的OD值结果差别大

z流沙z

可能是计数不够精准导致铺板的细胞量不一样，也有可能是细胞活力的差别

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问小鼠胰腺癌细胞panc02有没有同学养过呀，有没有低密度时候的照片呢为什么不同厂家推荐的培养基不同呢？

z流沙z

可以去ATCC上面查询，有细胞照片和培养基等信息

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问叶酸的性质是有多不稳定哇？有没有前辈给点建议。

dxy_a18nvxdq

注意大环境的影响，光和实验室里的环境

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问如何绘制果蝇胚胎发育的时空图谱，研究果蝇身体分节是如何确定的，以及分节过程中参与的基因开关和梯度信号是什么？

asswei

形态发生素调节首先表达的合子基因（缺口基因）。缺口基因表达区呈带状，带宽约3体节，不同缺口基因表达区之间有部分重叠，他翻译的蛋白质以及浓度效应调控成对控制基因的表达。成对控制基因的带状表达区将胚胎沿前后轴分成周期性单位。它翻译的蛋白质激活体节极性基因转录。体节极性基因表达产物进一步将胚胎分成14体节。同时，缺口基因和成对控制基因的编码蛋白质，以及体节极性基因与同源异型框基因之间的相互作用，调节同源

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问样本量计算

毛利小五郎的徒弟

打开spss在左侧界面中依次选择“Procedures (程序)”—“Regression (回归)”—“Multiple Regression (多重回归)”—“Multiple Regression using Effect Size (使用效应大小的多重回归)”在“Design (设置)”模块中按以下参数设置相应选项Solve For：“Sample Size”表示本分析的目的是用于计算样本

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问MDCK狗肾细胞形态问题，中间有圆圈

z流沙z

这应该是混入了其他细胞，细胞不纯导致的。可以尝试多稀释一下细胞，或者根据不同细胞的消化时间逐步消化去除

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问生物膜染色清洗

晴空a

解决办法：改善进水水质，调解合理PH值等。

3 回答106 围观

问多糖促进肿瘤细胞凋亡，qpcr细胞周期趋势为逆的

z流沙z

可以考虑换一个内参试试，比如actin，GAPDH可能不适合于细胞周期实验

3 回答45 围观

问如果贴壁细胞做cck8摸细胞种板浓度，加cck8之前让细胞贴壁时间超过了4小时以上，会有什么影响，新手没把握好时间，求救🆘🆘🆘🆘

毛利小五郎的徒弟

贴壁超过4小时的话，后期诱导可能没有那么容易成功

4 回答152 围观

问斑马鱼胚胎发育时空图谱有助于我们理解哪些胚胎发育过程中的模式形成及相关分子机理？

asswei

时空组相对应时间点的胚胎，进行单细胞测序，并利用SPOTlight整合scRNA-seq和Stereo-seq数据，绘制了斑马鱼胚胎的空间发育轨迹。最后，通过计算空间中不同时间点中配体-受体对的相对距离，发现在胚胎发育中具有潜在互作关系的配体-受体对，并确认了其在发育中具有的潜在调控功能。在10 μm的分辨率下，对不同时间点的斑马鱼胚胎进行了空间区域的划分，区分出不同组织边界。同时通过进一步的细化

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问GES-1细胞常见的损伤方式有哪些，可以用醋酸损伤不

天一湖医者

直接损伤，化学损伤等，可以用醋酸损伤。

5 回答95 围观

问请问如何检测未知浓度的样品？需要注意什么

asswei

1、先配置一个标准样品（B1#）（一般需要检测哪几种离子，就配哪几种离子的混合标准样品），其浓度可为仪器做线性指标时的最大浓度。（如我只需要仪器检测NO3―、SO42―两种离子，做线性时最大浓度对应为20ppm、20ppm，那么（B1#）为NO3―、SO42―两种离子的混合样）　　2、进（B1#），谱图采集完毕后手动停止，修改文件名，保存。按标准样品谱图处理方法对其进行处理（通过调节手动处理按

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问原代细胞首次传代问题

三岁就爱笑的丫头

看来这个细胞也是很娇贵的，在胰酶消化的过程中，你可以试试轻微吹打，不能单凭它自己消化，那样消化时间过长，对细胞是有损伤的。

3 回答96 围观

问如何进行T淋巴细胞体外培养法？

asswei

T淋巴细胞体外培养法T淋巴细胞转化试验（T细胞增殖试验）实验步骤1. 小鼠脾细胞悬液的制备取一个灭菌的平皿，加入5 ml Hank's液。颈椎脱臼法处死小鼠，取脾脏，放入平皿中，在钢网上研磨并过筛，制成细胞悬液。取出100 μl用于计数。将其余细胞悬液移入一离心管中，离心1500 rpm，7 min，（或1000 rpm，10 min）弃去上清，用RPMI1640 培养液稀释，制成2.5×10

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问MHCC-97h细胞越养，就越小，都缩起来了；还有HLE细胞养起来有什么技巧，经常吹不散

huarenqiang5

养HLE细胞技巧与方法: 传代密度 :细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养传代比例 :首次传代建议1：2传代传代方法: 1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2.加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM

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