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PEF值是计数资料还是计量资料
Dr_劉医生
是呼吸功能PEF指标(呼吸峰值流速)嘛?那PEF就是数值变量,属于计数资料
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为什么免疫荧光最后拍照后会变成细胞破碎。
仁心郎中1
个人认为应该是细胞质量及状态不好引起的
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求助|关于12孔板加药
Dr_劉医生
400ul都到头了,一般12孔板是100-200ul就够了,可以把浓度提高。
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做mtt实验接种96孔板,部分孔被污染,这是什么污染呢?像是细长状的虫子游来游去。
Dr_劉医生
可以试试加DMSO,这块板肯定不能用了,细长物质会影响吸光度的检测,后续镜下拍照根本看不清;
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细胞拉丝很快飘
Dr_劉医生
细胞没长好和出现拉丝,其实都是一个原因:接种密度太低,会导致细胞长不起来;稀疏时,细胞两级朝向不规律,细胞就会逐渐伸长,出现拉丝。
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3T3-L1前脂肪细胞诱导液储存
Dr_劉医生
问题不大,解冻就能用,而且一般是使用前再进行除菌操作。
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泡沫细胞模型
毛利小五郎的徒弟
做泡沫细胞时候脂蛋白分多次少量加入
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求助,细胞培养传代,发现有这类东西,肉眼能看到培养液中有一点絮状物
Dr_劉医生
不是真菌,首先并没有成菌落形态,而且镜下看更像是杂质污染
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问
MTT联合加药结果出现误差
Dr_劉医生
MTT结果不理想是普遍现象,因为MTT做的过程中步骤就过多,血清和药物存在交叉反应,容易造成误差。个人建议:我做这个做了5-6次,每次结果不同,重复性差且值的偏离也大,所以你可以多做几个复孔,做7个复孔,取5个相近的值,进行统计,另外空白孔要调0,作用浓度相差不大各组结果相差也会不大,你加大浓度间隔,会出现一些有意义的作用浓度的,作用结果趋势与设想差不多就可以了,必要时可人为做一些调整!
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问
自噬中可溶性P62和不可溶性P62有什么区别?
Dr_劉医生
首先p62两种状态,都是自噬活性的重要标记蛋白,在自噬过程中,p62蛋白大多同时存在:可溶性和不可溶性;区别在于自噬流活化时,可溶性p62蛋白减少,不可溶性p62无明显改变;自噬流阻断时,可溶性p62蛋白减少,但不可溶性p62明显增加。
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【求助】roc曲线一定要做逻辑回归后再做吗
Dr_劉医生
不需要,二者没有关联;ROC是看自变量X预测结局Y的灵敏度和特异性,计算曲线下面积。logistic回归是看X和Y的关联程度。
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问
到底有没有永生化hpmec?
毛利小五郎的徒弟
目前提供的hpmec都是永生化处理,可以用shrna 构建稳定敲除细胞系
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问
A549细胞形态
Dr_劉医生
肺组织的A549细胞株,镜下透明状是正常状态,除非镜下见到黑色细砂状的物质,才考虑是污染。
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细胞线粒体定位通透液选择
Dr_劉医生
细胞线粒体定位通透液可以试试健那绿;一般步骤是先染色线粒体,再进行通透实验
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问
溶酶体染色求助
仁心郎中1
Lyso-Tracker Green (1mM)在4℃冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。对于微量的液体,每次使用前先离心数秒钟,使液体充分沉降到管底。荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。Lyso-Tracker Green适用于活细胞染色,但不适合用于固定后细胞的染色。如果经Lyso-Tracker Gree
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细胞免疫实验
毛利小五郎的徒弟
不加T细胞靠体内免疫应答分化的T细胞理论上是可行的,但是免疫调控的通路很多。有可能同时存在多种免疫细胞的活化。加T细胞可以避免这个问题。
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问
关于细胞培养的一些问题(为什么培养基保存于4℃冰箱中,颜色会偏暗红色)
毛利小五郎的徒弟
因为温度降低时二氧化碳相对减少,培养基会碱性增大
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问
微管在高钙低镁情况下倾向于聚合为什么要使用EGTA去螯合钙离子呢?
毛利小五郎的徒弟
钙离子抑制微管聚合,对微管解聚有促进作用,因而,在微管相关的实验中,都要加入EGTA来特异性的螯合反应体系中可能含有的钙离子。
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问
LC3这种形状是什么原因呢
paj12345
Wb拖尾条带可能提示:分离胶浓度过高或者上样量偏多,样本降解,或者电泳液反复使用等等;
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问
LC3这种形状是电泳时间太久跑散了么
毛利小五郎的徒弟
这个反映时间太长,缩短时间再跑一下。
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