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ELISA实验显色问题

相关实验:酶联免疫吸附实验

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用碳酸盐包被液包被抗原,抗原对照用包被液做对照;然后使用3%的明胶封阻,封阻后血清用PBS稀释,并用PBS做血清对照;二抗是HRP标记的二抗,也用PBS稀释,并用PBS做二抗对照。

现在出现的问题,是抗原对照和血清对照都显色,而二抗对照不显色,并且同处理的抗原的吸光度基本上没差别。各位大佬,这是什么原因导致的?应该怎么解决?

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