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求助!最近在做中性粒细胞实验;遇到了一些难题,请问有没有大神可以解答一下
(1)中性粒细胞的培养条件是什么啊,我用的是10%1640培养的;
(2)中性粒细胞可以增殖吗?他是终末分化的细胞,是不是不可以增殖呀;
(3)种板的时候6孔板里细胞数undefined10的6次方,每孔细胞加20ul的RIPA裂解液,但是每次提细胞测蛋白浓度都是特别低的,以至于不能跑WB。
谢谢啦
我就是想问问题
想问一下用的rpmi1640是含hepes的吗
sswei
可以用RPMI1640培养基,其中含有10%胎牛血清。
土井挞克树
中性粒细胞一般是不可以增殖的,是炎性细胞分化而来
loveliufudan
1.中性粒细胞的培养条件包括培养基成分、温度、CO2浓度、湿度等。常用的中性粒细胞培养基包括RPMI-1640、DMEM等,通常加入10%胎牛血清和一定浓度的抗生素。温度一般为37℃,CO2浓度一般为5%。另外,中性粒细胞需要在无血清条件下预处理,以避免影响实验结果。
2.中性粒细胞是一种短寿命的细胞,通常存活时间不超过24小时。由于其终末分化,因此无法增殖。如果需要大量细胞,可以从骨髓中分离中性粒细胞,但这通常需要特殊的分离方法。
3.低蛋白浓度可能是由于细胞数目不足或裂解液浓度过低导致。建议使用更高浓度的裂解液或者增加细胞数目。另外,在取样时应注意不要破坏细胞膜,以免蛋白质外溢。
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