中性粒细胞运动功能的检测
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小吞噬细胞的运动可以分成随机运动和定向运动,前者类似于布朗运动。检测方法是将采集的白细胞悬液滴于玻片上,用光学显微镜直接观察其运动。也可用毛细血管法将细胞悬液装入硅化毛细血管中,稍加离心,使细胞沉积在一端,切去无细胞的毛细血管段,继而移放在含细胞培养液的培养小瓶中,37℃温育18~20h,游动的细胞将从毛细血管内外移,在管口形成一细胞团,根据细胞面积可判断受检中性粒细胞活动的强弱。某些患者中性粒细胞的任意运动明显减弱,甚至消失。中性粒细胞的定向运动表现为趋化运动,测定方法有多种,其原理相同,而方法大同小异,常用以下两法:
1.Boyden小室法又称滤膜小室法,采用特殊的小盒装置,盒中以一片3~5μm孔径的微孔滤膜将盒分为上下两小室。上室加受检的白细胞悬液;下室加细菌菌体或其产物、酵母菌活化的血清等趋化因子。置37℃温育数小时。医学教|育网搜集整理上室中的中性粒细胞因受下室内趋化因子的招引,使细胞由滤膜微孔进入滤膜内,最后取滤膜,经固定、干燥、着染、脱色等步骤,将透明后的滤膜置油镜下检测细胞在膜内通过的距离,求其趋化单位。
2.琼脂糖凝胶平板法将含小牛血清的1%琼脂糖倾到在玻片或平皿中制成凝胶平板,继而打孔,每三孔为一组,中央孔加细胞悬液,两侧孔分别加趋化因子或对照培养液,经37℃温育2~3h后,用2%戊二醛固定,移去琼脂糖层,经染色后,测量细胞运动的距离,按下式计算移动指数。