中性粒细胞功能（细胞运动、吞噬和杀菌）的检测

　　体内具有吞噬功能的细胞群按其形态的大小分两类：一类为大吞噬细胞；另一类为小吞噬细胞，亦即中性粒细胞。两类在形态上各有其特征。外周血或实验动物腹腔液等标本中白细胞分类和计数为重要的常规指标，人外周血中性粒细胞的数量对诊断大多数感染性疾病具有重要的参考价值。
　　吞噬细胞的吞噬活动大致分趋化、吞噬和胞内杀灭作用三阶段，在免疫学实验研究和临床检验中已建立相应的检测方法。

中性粒细胞功能的检测
　　（一）细胞运动功能的检测
　　小吞噬细胞的运动可以分成随机运动和定向运动，前者类似于布朗运动。检测方法是将采集的白细胞悬液滴于玻片上，用光学显微镜直接观察其运动。也可用毛细血管法将细胞悬液装入硅化毛细血管中，稍加离心，使细胞沉积在一端，切去无细胞的毛细血管段，继而移放在含细胞培养液的培养小瓶中，37℃温育18～20h，游动的细胞将从毛细血管内外移，在管口形成一细胞团，根据细胞面积可判断受检中性粒细胞活动的强弱。某些患者中性粒细胞的任意运动明显减弱，甚至消失。中性粒细胞的定向运动表现为趋化运动，测定方法有多种，其原理相同，而方法大同小异，常用以下两法：
　　1．Boyden小室法又称滤膜小室法，采用特殊的小盒装置，盒中以一片3～5μm孔径的微孔滤膜将盒分为上下两小室。上室加受检的白细胞悬液；下室加细菌菌体或其产物、酵母菌活化的血清等趋化因子。置37℃温育数小时。上室中的中性粒细胞因受下室内趋化因子的招引，使细胞由滤膜微孔进入滤膜内，最后取滤膜，经固定、干燥、着染、脱色等步骤，将透明后的滤膜置油镜下检测细胞在膜内通过的距离，求其趋化单位。
　　2．琼脂糖凝胶平板法将含小牛血清的1％琼脂糖倾到在玻片或平皿中制成凝胶平板，继而按图22-1打孔，每三孔为一组，中央孔加细胞悬液，两侧孔分别加趋化因子或对照培养液，经37℃温育2～3h后，用2％戊二醛固定，移去琼脂糖层，经染色后，测量细胞运动的距离，按下式计算移动指数。
　　移动指数＝趋化移动距离／任意移动距离
图22-1 琼脂糖平皿法打孔谱型