中性粒细胞吞噬功能的测定

中性粒细胞是外周血循环和免疫系统中含量最丰富的免疫细胞，具有变形与吞噬能力，在抵抗疾病和保护机体方面起着非常重要的作用。中性粒细胞可以黏附于大静脉内皮细胞表面，在感染和应激时可被快速动员。具有趋化、吞噬和杀菌等多种生物学功能，是机体固有免疫系统的重要组成部分。将白细胞悬液与细菌混合一段时间后，取样涂片染色镜检，可以测定中性粒细胞吞噬百分率和吞噬指数，判断中性粒细胞的吞噬功能。

金黄色葡萄球菌（悬液）
肉汤培养基 硷性美蓝液 生理盐水 甲醇 抗凝剂（3.8％枸橼酸钠）
培养箱 水浴锅 血红蛋白吸管 玻片 小试管 载玻片 采血针 酒精棉球

一、操作方法

1. 取小试管1支，加入3.8％枸橼酸钠溶液1滴(0.4 ml)。

2. 酒精棉球消毒手指和采血针，消毒部位取血2～3滴(约0.2 ml)加入小试管，混匀。

3. 取菌液1滴(约0.1ml)加入小试管，吹吸混匀。

4. 置37℃水浴锅15min，中途混匀1次。

5. 取出小试管，用吸管将试管中混合血液打匀后，取血半滴于载玻片上，用另一载玻片推成薄血片。

6. 载玻片静置，待血片自干后，瑞氏染色法染色。

二、结果分析

吞噬细胞%=即100个中性粒细胞中吞噬有细菌的细胞数；

吞噬指数=将100个中性粒细胞所吞噬的细菌总数除以100，得到每个白细胞吞噬细菌的平均数，即为吞噬指数。

1. 由于不同标本的个体差异及年龄和健康状况不同，吞噬能力有差别。

2. 涂血片时不宜过厚，否则不易观察结果。

3. 本实验属于活菌实验，注意无菌操作，注意个体生物安全。