原理
中性粒细胞（polymorphonuclear leukocyte，PMN）的功能包括粘附、移动、吞噬杀菌等，是机体天然免疫力的重要组成部分。吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能，在机体非特异性免疫中发挥重要作用。
材料与仪器
中性粒细胞
NBT盐水 PBS 硝基蓝四氮唑 肝素 甲醇 沙黄水
试管 毛细滴管 玻片 培养箱 显微镜
NBT盐水 PBS 硝基蓝四氮唑 肝素 甲醇 沙黄水
试管 毛细滴管 玻片 培养箱 显微镜
步骤
一、试管法
肝素抗凝血0.1 ml 滴于小试管底部，再加入等量NBT应用液
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37℃，30分钟（中间摇动一次），再置室温15分钟
37℃，30分钟（中间摇动一次），再置室温15分钟
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摇匀，用毛细管取一滴放于玻片一端，做血涂片
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立即用电吹风吹干，甲醇溶液固定1分钟，10 g/L 沙黄水溶液染色5分钟
立即用电吹风吹干，甲醇溶液固定1分钟，10 g/L 沙黄水溶液染色5分钟
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PBS冲洗、自然干燥、油镜检测
二、微量法
取硅油处理的1 mm x 75 mm 的毛细管取末梢血至30 mm 处
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立即吹入硅油处理的凹玻片中，与1/30量的0.05%肝素溶液混合↓
加等量的1 g/L NBT，轻轻摇动混合，湿盒内，37℃，室温15分钟
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用毛细管吸去表层上清液，用硅油处理的毛细管吹数次混匀
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吸出少许制成血片，空气干燥，沙黄水溶液染色，油镜观察
三、结果
1. 血片中有10%以上的中性粒细胞的胞质中有蓝紫或蓝黑颗粒沉着，其沉着颗粒形状大小不一，有的呈大块状，有的呈点状或放射状。
1. 血片中有10%以上的中性粒细胞的胞质中有蓝紫或蓝黑颗粒沉着，其沉着颗粒形状大小不一，有的呈大块状，有的呈点状或放射状。
注意事项
1. NBT配制一定要完全溶解，滤液要呈透明的淡黄色，储存于棕色瓶中；
2. NBT应用液应于用前配制；
3. 血涂片要求推出尾部，不可过厚或过薄。血液与NBT要充分混合，保温时间不能过长；
4. 细胞涂片要轻，以免推破巨噬细胞。涂片不可过厚或过薄，以免影响观察结果。
来源：丁香实验
