原理
巨噬细胞是人体重要细胞。 巨噬细胞吞噬功能测定就是测定巨噬细胞吞噬功能。人巨噬细胞可从经斑蝥激发的皮疱液中获取。
材料与仪器
人巨噬细胞
乙醇 瑞士-姬姆萨染色液
离心机 培养箱
乙醇 瑞士-姬姆萨染色液
离心机 培养箱
步骤
一、材料准备
1. 斑蟊浸液制备:斑蟊以95%乙醇溶液制成10%酊剂,室温下浸泡2周后使用。
2. 人巨噬细胞的获取:取滤纸片蘸斑蟊酊,置于一侧前臂皮肤上,在滤纸片上盖一塑料片,再以清洁纱布固定4~5小时,取下滤纸片,再用塑料瓶盖将局部罩上,以防形成的水疱破裂,48小时即可形成完整的水疱。
二、实验步骤
取水疱渗出液0.5 ml,加5%鸡红细胞悬液0.01 ml
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混匀,置37℃水浴30分钟(每10分钟轻轻摇晃一次)
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混匀,置37℃水浴30分钟(每10分钟轻轻摇晃一次)
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1000 r/ min 离心5分钟,弃上清,留少许液体混匀细胞,涂片
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用甲醇溶液固定后,用瑞士-姬姆萨染色,油镜观察
注意事项
1. 细胞涂片要轻,以免推破巨噬细胞。涂片不可过厚或过薄,以免影响观察结果。
2. 斑蟊酊剂皮肤炎性渗出液大多再1 ml,最多的可达6 ml,渗出液中所含巨噬细胞平均为30%~40%,最多可达80%。
3. 抽取水疱液时,将皮肤消毒后,用无菌注射器抽取,盛于无菌试管中;局部敷以无菌纱布,24小时后取下纱布。用此方法病人无痛苦及不良反应。
常见问题
巨噬细胞是人体重要细胞。 巨噬细胞吞噬功能测定就是测定巨噬细胞吞噬功能。人巨噬细胞可从经斑蝥激发的皮疱液中获取。
来源:丁香实验