中性粒细胞贴壁和培养时间的问题

各位老师好，本小白最近在做中性粒细胞NETs，在中性粒细胞贴壁上遇到了困难。

1.我用的是多聚赖氨酸处理的玻片，想请教一下加入中性粒细胞后的贴壁时间，是用涂片的方式还是加入培养基培养贴壁的方式？时间大概是多久呢？

2.由于贴壁后要用其他细胞上清液进行共培养，有老师做过这种吗？请问共培养大概需要多少时间呢？

3.刺激形成NETs后，若想用wb进行验证，是直接提取中性粒细胞总蛋白，还是进行离心后上清液的总蛋白呢？

4.最近做中性粒细胞实验总是抽自己的血进行分离，感觉有点吃不消了😭请问有更好的获得中性粒细胞的办法吗？

感谢各位老师指点