请问EdU和Ki67做免疫荧光染色，怎么同时染

EDU是一种新型的非放射性同位素细胞增殖检测的方法，在细胞培养、实体组织及临床研究中得到了广泛的应用。该技术可用于细胞成像、流式、细胞示踪、DNA损伤修复检测、线粒体活性检测以及病毒增殖活性检测等，EdU亦适用于活体注射。与传统的免疫荧光染色检测方法相比，EdU检测法更简单、更快速、更准确，不需要严苛的样品变性(酸解、热解、酶解)处理，有效地避免了样品损伤，有助于在组织、器官的整体水平上观测细胞增殖的真实情况，具有更高的灵敏度和更快的检测速度。

而Kⅰ67则首先将组织以10%氢氧化钠溶液进行鲜片预处理,以达到组织解剖的目的，然后,将组织进行穿透,以植入Ki67抗体并加以保护;再然后,将Ki67抗体被可见染色,以突出细胞核或细胞浆;最后,使用显微镜或荧光显微镜观察染色细胞。所以，Ki67染色一般在EDU染色之后进行。

EdU和Ki67都是常用的细胞增殖标记物，可以通过免疫荧光染色来检测。同时染色需要注意以下几点：

免疫荧光染色的步骤需要严格控制，避免不必要的误差。建议采用优化的协议进行实验。

EdU和Ki67的抗体标记需要使用不同颜色的荧光染料，如EdU可以用Alexa Fluor 488，而Ki67可以用Alexa Fluor 594。

EdU染色需要在固定和渗透化后进行，而Ki67染色需要在固定前进行。因此，可以先进行EdU染色，然后对细胞进行Ki67染色。

在进行染色前，可以使用EdU染料和Ki67抗体标记的初步实验来确定两者的最佳染色条件。这将有助于提高实验的成功率。

免疫染色后，需要使用荧光显微镜观察细胞标记的荧光信号。在分析荧光显微镜图像时，需要分别分析EdU和Ki67的信号，并在图像中区分两者的荧光信号。

总之，通过合理的实验设计和优化的免疫荧光染色方案，可以同时检测EdU和Ki67的荧光信号，从而研究细胞增殖和分裂的相关问题。