晴空a
将切片移入湿盒中加入新鲜配制的3%双氧水,以去除内源性过氧化物酶封闭液,室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
毛利小五郎的徒弟
选用特异性高的抗体,染色前可以进行封闭来减少非特异性染色。
sswei
免疫组化中,为降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,处理的办法为:灭活碱性磷酸酶:最常用的方法是将左旋咪唑(24 mg/mL)加入底物液中,并保持PH值在7.6-8.2,即能除去大部分内源性碱性磷酸酶;对于酸性磷酸酶,可以用50 mmol/L的酒石酸抑制;对于内源性过氧化物酶,可以用0.9%的双氧水来灭活。对于内源性生物素,染色前将切片浸于25 μg/mL亲和素溶液中15分钟,PBS清洗15分钟后即可染色。也可以24 mg/mL的卵白素封片15分钟。