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pcDNA3/B7.1表达载体的构建,如何做

相关实验:分子生物学实验

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dxy_4v922cf0

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3 个回答

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bamboopiggy

有帮助

直接找公司构建就可以,现在好些测序公司直接给做。要是自己做,先分清楚是人的还是鼠的,然后找相应的细胞,自己提取cDNA,然后pcr 克隆出来,连接到pcDNA3.1载体上就可以。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

可以使用克隆载体构建,或者用质粒转导。

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loveliufudan

有帮助

构建pCDNA3/B7.1表达载体的步骤如下:

1.获取B7.1 cDNA:可以使用RT-PCR或其他方法从目标细胞中获得B7.1的cDNA。

2.剪接B7.1 cDNA:使用酶切剪接技术,将B7.1 cDNA片段插入pCDNA3表达载体。

3.用酶切核酸技术将B7.1 cDNA插入pCDNA3载体:使用合适的酶切酶和酶切反应条件,切开pCDNA3载体,并将B7.1 cDNA插入载体。

4.筛选纯化:通过PCR、酶切验证等方法,筛选并纯化出构建好的pCDNA3/B7.1表达载体。

5.存储:将纯化后的表达载体储存在适当的环境下,以备后续使用。

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