bamboopiggy
直接找公司构建就可以,现在好些测序公司直接给做。要是自己做,先分清楚是人的还是鼠的,然后找相应的细胞,自己提取cDNA,然后pcr 克隆出来,连接到pcDNA3.1载体上就可以。
土井挞克树
可以使用克隆载体构建,或者用质粒转导。
loveliufudan
构建pCDNA3/B7.1表达载体的步骤如下:
1.获取B7.1 cDNA:可以使用RT-PCR或其他方法从目标细胞中获得B7.1的cDNA。
2.剪接B7.1 cDNA:使用酶切剪接技术,将B7.1 cDNA片段插入pCDNA3表达载体。
3.用酶切核酸技术将B7.1 cDNA插入pCDNA3载体:使用合适的酶切酶和酶切反应条件,切开pCDNA3载体,并将B7.1 cDNA插入载体。
4.筛选纯化:通过PCR、酶切验证等方法,筛选并纯化出构建好的pCDNA3/B7.1表达载体。
5.存储:将纯化后的表达载体储存在适当的环境下,以备后续使用。
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