britneyspears0
求助!最近买了Axis-Shield家的Polymorphprep分离液,想分离中性粒细胞,今天用小鼠外周血试了一下为什么完全分不出来。用2.5ml外周血加2.5ml PBS稀释,加入到5ml分离液上,24℃ 450g 30min,升降速都为0。
纵横捭阖DTOU
覆盖在分离液上的时候有没有分层存在,如果有的话考虑可能是小鼠全血太少了,覆盖的时候太快,缓冲进入下层的也会影响结果,就是一定要缓慢,看你的图分层不够干净,有红细胞混杂在上层。
c_Yeats
EDTA抗凝全血不稀释(后加)和Polymorphprep(先加)1:1
500g 30min at 18-22℃
britneyspears0
您好,您这个图片是哪里找到的呢?我在Axis- shield官网上都找不到这个分离液的protocol……
c_Yeats
网址发不出来,你试试关键字检索就出来了
毛利小五郎的徒弟
可能是中性粒细胞离心时间不够。分离离心很关键,注意离心环节。
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