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肝脏免疫荧光非特异性着色

相关实验:免疫荧光技术

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实验小助理静静

我染了肝脏的应该表达在巨噬细胞细胞核的一个目的蛋白,巨噬细胞只占肝脏的20%左右,结果整个肝脏都是非特异性着色,且目的蛋白着色也不深,就像染HE一样,我真的不知道该怎么办了

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3 个回答

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balalaLy

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绿色像是组织自体荧光,有没有做全阴性对照?就是一抗二抗都没加的。

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bamboopiggy

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换个公司的抗体试试吧,感觉这个抗体你估计很难做出好结果。

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whilt-shirt

有帮助

产生非特异性染色的主要因素

(1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。

(2)抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白,可与组织成分结合。

(3)除去检查的抗原以外,组织中还可能存在类属抗原(如Forssman氏抗原),可与组织中特异性抗原以外之之相应抗体结合。

(4)从组织中难于提纯抗原性物质,所以制备的免疫血清中往往混杂一些抗其他组织成分的抗体,以致容易混淆。

(5)抗体分子上标记的荧光素分子太多,这种过量标记的抗体分子带过多的阴离子,可吸附于正常组织上而呈现非特异性染色。

(6)荧光素不纯,标本固定不当等。

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