WB目标带是空白，周围有背景

因为你蛋白浓度太高了，把发光试剂很快消耗光了，来不及拍照，可以试试降低蛋白浓度。

二抗的HRP 活性太强，将底物消耗光；底物不稳定，失活； 二抗失活。一抗或者蛋白提取出现问题。

一抗浓度较高，二抗上HRP 催化活力太强，同时你的显色底物处于一个临界点，反应时间不长，将周围底物催化完，形成了空白即“反亮现象”。将一抗和二抗浓度降低，或更换新底物。