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固定化金属螯合亲和层析法:配体稳定性高,吸附量大,洗脱条件温和,但同样也更加复杂,因为需要额外的步骤固定金属离子。
离子交换层析法:离子交换层析是一种较为常见并被广泛使用的抗体纯化方法。
尺寸排阻色谱法:可用于DNA,蛋白质的纯化,缓冲液更改,脱盐等。
疏水作用层析法:与蛋白质的作用比较温和,所以能够更好地保持生物大分子的天然结构和生物活性,同时疏水作用也非常擅长从大体积样品中提取低含量的目标蛋白。
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亲和层析法:适用于从成分复杂且杂质含量远大于目标物的混合物中提纯目标物。
Protein A,Protein G与Protein A/G抗体纯化法:金黄色葡萄球菌蛋白A 和链状球菌蛋白G是最为常见的两种用于纯化全长抗体的配体,它们能够与不同物种或不同亲和力的抗体结合。
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抗体纯化方法从非常粗制到高度特异性不等:
1.粗制型抗体纯化方法——血清总蛋白(包括免疫球蛋白)的一个子集形成沉淀
2.一般型抗体纯化方法——对特定抗体类别(如 IgG)进行亲和纯化,但不考虑抗原特异性
3.特异性抗体纯化方法——仅对在样品中与特定抗原分子结合的那些抗体进行亲和纯化
怎么纯化取决于你对这抗体的预期用途。