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蛋白质浓度测量不准时,如何保证western blot上样量?

相关实验:免疫印迹(immunoblotting)

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dxy_zh8hbd25

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4 个回答

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whilt-shirt

有帮助

先根据BCA结果上一次,再根据第一次实验结果通过校准内参来调节上样量

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Hey裴pei

有帮助

建议用不同的试剂盒测蛋白浓度,如果还不准的话,可以根据内参调整上样量

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bamboopiggy

有帮助

只要你用同样的方法处理样品,同时做蛋白定量,同时稀释,一般相差不会太大,蛋白浓度也是一个相对值。实在不行可以跑胶后,根据内参再调一次上样量。

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天一湖医者

有帮助

在进行Western blot检测前,先用其他方法检测样品浓度,比如通过BCA法,Lowry法,Bradford法等。检测后根据样品浓度调整上样体积,这样既可保证上样量一致。

如果无法检测样品浓度,可以先在SDS-PAGE跑完后进行考染或者银染,根据SDS-PAGE的结果适当调整上样体积,也可以保证Western blot时上样量一致。

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