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怎么确定上样量呢?怎么计算?为什么WB条带会跑歪,那怎么处理呢?

相关实验:免疫印迹(immunoblotting)

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yanhailan

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3 个回答

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府宅

有帮助

这要根据你做的蛋白表达量多少,一般是用DAB显色要50-100μg,用ecl曝光上样量为20-40μg。但根据你蛋白表达量的不同目标蛋白绝对量DAB法至少50pg,ecl法至少20pg。

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dxywode

有帮助

按测出的蛋白量加4×上样缓冲液(3:1),然后用1×上样缓冲液都补至每孔15微升。

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whilt-shirt

有帮助

先用BCA法测总蛋白浓度,然后每孔先按20ug左右上样,根据第一次WB结果来调整上样量。条带歪可能是电泳原因,电泳时胶未放正

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