为什么ELISA实验中同一样本的复孔会相差很大？如何避免有这样大的差别？

1.可能样本没有混匀，2.可能存在串孔污染，3.可能存在包被不均匀不完全的情况

在酶联免疫吸附试验，同一样本的复测孔，如果是同一操作者，在相同的实验环境没有发生实验中的交叉污染时，是不会出现吸光度值相差很大的情况。在检测前，一定要对洗板机进行冲洗，另外要严格按照浓度配比进行洗液的配制，要用标准的微量加样器，手法标准的加样，要进行阴性对照，阳性对照和质控品的加样同一化加样。西板的过程也要注意加注洗液的高低一致，同时，拍板要干净，以防交叉污染

在实验室阶段，或许需要屡次稀释，然后将不同稀释次数的别离做复孔，以便查看稀释进程中带来的差错；假设同一次稀释的复孔共同的存在检测差异大，或许ELISA板的均一性存在必定问（排除操作因素）。假设不同稀释次数差异大，说明稀释方法有问题。

在多个步骤放培养箱中孵育时，使用胶将孔上贴好，避免部分未贴好造成溶液挥发。使用排枪加样或者缓冲液时，吸取有关注一下每个tip的页面，避免上样时，体积不一致。建议选择可靠的试剂盒，部分市售试剂盒抗ti包被不均匀，容易造成结果不稳定