1. Western blot结果中的背景为什么较高? 2. Western blot结果中无信号或显示信号弱

1. 抗体浓度过高，洗涤不充分。
2. 封闭不充分。
3. 使用了不恰当的封闭剂，可尝试不同的封闭剂。
4. 曝光过度。
5. 操作过程中膜干了。
6.发光液质量问题。

第二个问题：1.抗体浓度过低或抗体失效-增加抗体浓度、换用别的抗体并设置阳性对照；2.样品中目的蛋白表达量低-增加蛋白上样量；3.曝光时间过短或者发光液过期-增加曝光时间、换用新曝光液；4.蛋白未转到膜上-用预染marker或者丽春红评估转膜效率，考虑是否是转膜条件的问题

膜封闭不够——延长封闭的时间；选择更加适合的封闭液。一抗稀释度不适宜——对抗体进行滴度测试，选择zui适宜的抗体稀释度。一抗孵育的温度偏高——建议4℃结合过。膜在实验过程中干过——实验过程中要注意保持膜的湿润。检测时曝光时间过长——减少曝光时间。