检测蛋白泛素化实验中什么时候加MG132

各位老师，想请问一下：

我想检测一下过表达蛋白A会不会使蛋白B泛素化

具体实验设计类似下图，在过表达HA-Ub的条件下把蛋白B做IP拉出来后用泛素化抗体检测，我我想请问一下MG132什么时候加呢？是转染HA-Ub后吗？

感谢！