做wb实验时怎么保证蛋白不被降解

1、样本制备过程中尽量保持低温,避免蛋白变性、降解；

2、加入PMSF，抑制蛋白酶活性；

收蛋白时冰上操作，处理完以后，分装小份，避免反复冻融。lysis里面加蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂。

提取的时候需要加入蛋白酶抑制剂，全程冰上操作

组织中的蛋白酶活性更强,需要加入抑制蛋白酶活性的抑制剂,防止蛋白降解。