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如何有效捕捉蛋白印迹图片?

相关实验:质谱在蛋白质组学中的应用实验

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小鱼儿2022

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7 个回答

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sunny陈520

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有效捕捉是让蛋白最佳显色吗?我们实验室用的是荧光显色,所以直接显色就可以了,现在很多仪器是自动曝光,也会自动选择最佳曝光时间,如果是暗室的话,需要根据蛋白曝光程度,如果很容易曝光,几秒就可以了,如果很难显色,可能压片的时间要长一点

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未来9

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Western 荧光检测取决于抗原含量—一抗敏感度—二抗敏感度—底物敏感度—显影和定影效率这一系统。
如果看到荧光则压 10~30s,看不到则同时压两张,10~30 min 洗一张,如果无则再补一张,1 h 后洗。再无,则压过夜。共 3 张片,根据每次结果调整。其中两张片子的压法如下描述: 先剪一张比膜长 2~3 厘米的片子(以供贴胶带),然后剪 2 片细小透明胶带贴到片子的左右两边(贴时胶带留一半用于粘到封口膜上),然后将片子压到膜上,并使透明胶带留出的一半粘到封口膜上。

这样就固定了第一张胶片,就不会因为放、取第二张胶片而使第一张移动了。然后放第二张胶片,与第一张片子贴在一起就行,注意片子要干燥,压片前用纸擦干封口膜,以避免被底物液体污染导致与下面一张粘在一起。取时用手轻轻拂过就可以把上面片子与下面一张错开了,不要用手抠,否则下面一张也移动了。

在洗下面一张片子时一定要取掉粘在片子上的胶带,否则在胶带的地方会影响显影。荧光经过下面一张胶片会稍微有些衰减,所以下面一张胶片感光稍微比上面一张强一些。

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天一湖医者

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需要具有足够空间分辨率的传感器来捕获高分辨率镜头的输出。最终图像的质量决定于质量最差的组件,因此必须同时考虑传感器和镜头的分辨率。

要获得高分辨率的图像,就需要引入失真最小的高质量镜头。高分辨率和高灵敏度(低 f值)都需要高质量的镜头。

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vae1476

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可以用自动曝光机,会直接扫描图片,也可以用手动胶片曝光,再把胶片扫描成图片

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Kimser

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可能设备更好会有用一些,普通的凝胶成像仪对于弱一点的信号不是特别灵敏

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bamboopiggy

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你如果用机器扫,就用自动程序吧,他们会自动感光,如果用胶片,建议按照条带的亮度决定压片时间,一般是1-5-10-20-40--60-90s-120s,然后压一个长时间的例如2h,基本都能抓到信号。实在不行就一次压5张片子,半小时以后显影,总能得到需要的条带。

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