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方案1 蛋白质和多肽 MALDI-MS 分析的一般方法

相关实验:质谱在蛋白质组学中的应用实验

最新修订时间:

材料与仪器

冷冻干燥样品
校准标准品 基质溶液 甲醇
MALDI 质谱仪 MALDI 板

步骤

1.吸取 0.5ul 的基质溶液,加到 MALDI-MS 分析所用的金属样品板上的样品孔中(为了准确起见,请使用2ul 的移液器)。

2.在基质干燥之前,迅速加入 0.5ul 的标准品或样品到基质中。

3.置于室温条件或 40℃ 的烘箱内约 5 min,让溶剂蒸发以使样品干燥。

4.把金属板转移到质谱仪的真空舱内。

5.以恰好高于离子化阈值的激光能量来「预热」校准标准品,从而获得初始质量图谱。

6.然后,降低激光能量直到获得高质量的图谱。

7.用适合的校准物来获得线性的两点(two—point) 外标校准(参考表 8.9 和表 8.10)

8.对未知样品重复步骤 5 和步骤 6, 并与校准值相比较以获得精确的质量。

9.使用完毕后,用水彻底冲洗 MALDI 板以除去任何可见的晶体,然后再用无棉绒薄纸(例如,Kimwipes 纸)沾甲醇擦拭。

来源:丁香实验

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