非标,具体原理你可以去看看我之前的帖子。你这个实验,前期定量在这个实验里面非常重要,毕竟全蛋白如果TIC差距过大,normalization还有个内参蛋白参考。建议送样前跑胶定量。DTT,IAA的母液可以使用10mM-50mM的NH4HCO3溶液,也可以用水配母液。具体工作浓度varies a lot by studios,自查JPR或者MCP文章。IAA注意避光配置,避光孵育,不宜反应时间过长。
DTT,IAA做还原烷基化,作用浓度没有过于严苛的要求。组学你要是不熟悉,操作你全程进口试剂EP管,防止内衬污染。这个分泌型蛋白差异表达不好搞啊,这个实验的顶层设计有没有问题?你这种情况适合直接和质谱系统联系。