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为什么核酸的纯度是以OD260/OD280的比值作为检测标准?有没有其他的检测标准呢

相关实验:RNA提取及检测

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简3MVS


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3 个回答

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loveliufudan

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这是因为核酸在260nm处的吸光度最大,而蛋白质则在280nm处吸光度最大。因此,OD260/OD280的比值可以用来估计样品中核酸和蛋白质的相对含量,从而评估核酸的纯度。

理想情况下,DNA的OD260/OD280比值应接近1.8,而RNA的比值应接近2.0。如果比值低于这些数值,通常表示样品中蛋白质的含量较高,即核酸的纯度较低。

除此之外,还有其他的一些方法可以用来评估核酸的纯度和质量,比如凝胶电泳可以用来直观地评估核酸的大小和完整性。更为先进的方法如Bioanalyzer或TapeStation等可以提供更为详细的信息,包括核酸的大小分布、浓度和纯度等。

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毛利小五郎的徒弟

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因为核酸中影响纯度的物质是蛋白质,而蛋白质在260处是没有吸光度的,所以是看DNA或者RNA的纯度,可以通过OD260/0D280比值来衡量,DNA的 OD260/0D280比值在1.8-20; RNA的 >2.0。如果比值< 1.8,说明有蛋白质残留

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dxy_xextz7w2

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OD是optical density (光密度)的缩写,OD=1og (1/trans) ,其中trans为检测物的透光值。吸光度是指光线通过溶液或某一物质前的入射光强度与该光线通过溶液或物质后的透射光强度比值的对数,影响它的因素有溶剂、浓度、温度等等吸光系数与入射光的波长以及被光通过的物质有关。只要光的波长被固定下来,同一种物质,吸光系数就不变。当一束光通过一-个吸光物质(通常为溶液)时,溶质吸收了光能,光的强度减弱。吸光度就是用来衡量光被吸收程度的一个物理量。蛋白中trp、tyr、phe的吸光度为280nm常用来表示蛋白质吸光度;而260nm为DNA的吸光度,此方法是唯一通用的判定方法。

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