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RNA提取为什么DNA和蛋白质在中间层和下层即有机相,而RNA在水相

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北纬30度到此一游


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3 个回答

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loveliufudan

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在常规的RNA提取过程中,细胞或组织样品首先被裂解,细胞膜和核膜被破坏,释放出细胞内的各种分子。随后,加入酚酸混合物(例如酚/氯仿),形成两个相,其中有机相和水相。

这种分离主要是由于酚酸混合物的化学特性和密度差异所致。酚酸混合物中的酚主要与蛋白质相互作用,形成酚蛋白复合物,使蛋白质沉淀到有机相中。另一方面,RNA与水相中的水结合,形成水相中的RNA溶液。

DNA和RNA的相互作用性质不同,导致它们在RNA提取过程中表现出不同的分配方式。DNA具有较强的亲酚性,与酚的相互作用较强,因此DNA会与蛋白质一起沉淀到有机相中。而RNA在水相中溶解度较高,更倾向于与水相中的水结合。

需要注意的是,这种分离方法并不是完全特异的,可能会存在一定程度的重叠。因此,在进行RNA提取时,仍需要采取额外的步骤来纯化和去除潜在的污染物,如DNA和蛋白质。常见的方法包括使用DNA酶和蛋白酶进行降解,以及使用RNA纯化柱或其他纯化方法进行进一步处理。

总之,RNA在RNA提取过程中溶于水相,而DNA和蛋白质倾向于沉淀到有机相中,这是由于它们与酚酸混合物的化学相互作用性质和密度差异所导致的。

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土井挞克树

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因为rna提取利用的是trizol试剂的rna保护溶解特性,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后,裂解液分层成水相和有机相。此时RNA被留在水相中,而dna则分离到有机象

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dxyc42u

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在偏酸性条件下,rna更加溶于水

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