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细菌做定量pcr,以cDNA做模板,pcr条带很杂,而用基因组做模板条带单一,这是什么原因?谢谢回答!

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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Lee1D7B

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5 个回答

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bamboopiggy

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cdna是不同长度的,如果你的引物不是那么特异,产物就会很多。而genomic dna做模板,引物是跨内含子设计,比较长,非特异产物在30秒内扩增不出来

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天一湖医者

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在你现有的退火温度上各增加三度,降低三度,都去试一下先;如果杂带的长度比目的带长的话,就适当缩短退火和延伸时间。

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汤姆卜丽波

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按道理,因为cDNA不含有内含子这些,所以它比基因组更适合做模板,你这种情况可能是引物特异性不高。

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Eason老歌迷

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基因组比较复杂,一般要提取基因组,再PCR的。如果要是pcr条带很杂,可能是你有污染。

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秋秋欣欣

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有可能是引物设计的质量不太好。

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