qPCR重复性和结果处理
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1、qPCR实验重复性是指一次实验复孔4个，在同一96孔板上重复3次，即每个细胞每个基因做12个孔。还是一次实验复孔4个，每个细胞每个基因做4个孔，重复做3天。（最后去掉差异大的复孔的CT值）
2、结果处理：①计算时是同时计算3次独立实验的2-ΔΔCT值，然后3次独立实验做成一张图；还是每次独立实验都分开计算，做3张图。②计算时是所有数据的3个复孔CT值取平均值，然后再计算2-ΔΔCT；还是直接算，不取平均值。
3、我现在的问题：我现在用的是一次实验复孔4个，每个细胞每个基因做4个孔，重复做3天。3次实验的2-ΔΔCT差的有点大，有时候相差4倍左右，但是趋势相同、都比对照组高，这个实验结果可以吗？
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3 个回答
bamboopiggy
有帮助
1、实验性重复，是指每次实验，每个样品，针对每个基因要有最少三个复孔。不用12个，也不用重复三天。
2、①这个都可以，看你想怎么处理。
②3个复孔取平均值。
3、你的实验结果可以，但是太费了，你只要做3个复孔，做一天就可以。
Eason老歌迷
有帮助
问题一，qPCR实验重复性是一次实验复孔4个，每个细胞每个基因做4个孔，重复做3次。问题二:①计算时是同时计算3次独立实验的2-ΔΔCT值，然后3次独立实验做成一张图。②计算时是所有数据的3个复孔CT值取平均值，然后再计算2-ΔΔCT。
跑出来趋势相同、都比对照组高，这个实验结果可以。
whilt-shirt
有帮助
重复一般是一组重复做3个以上样本，然后跑qPCR时一个基因做3个以上复孔。看你的描述，这个结果是可以用的
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