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qpcr内参不齐怎么办

相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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娜娜默默

  1. qpcr内参不齐,组间差距最大的是2,有13-15点多之间,提rna后测了rna浓度再逆转录的,不知道为什么还是不齐
  2. 同样本有几个std0.3的,请问数据还可以用吗?
  3. 不知道这样的情况应该怎么处理数据或者需要怎么改进实验方法呢?
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3 个回答

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loveliufudan

有帮助

1.qPCR内参不齐可能是由于实验条件不稳定或试剂不纯导致的。在进行逆转录之后再测定MA浓度可能不能解决问题。建议检查实验条件,确保试剂纯度,并考虑使用其他内参。

2.如果std值为0.3,可能表明实验的结果具有较大的不确定性。因此,这些数据可能不能用于进一步的分析。建议重复实验或改进实验条件以减少不确定性。

3.建议重新评估实验条件,确保试剂纯度,并考虑使用其他内参。如果问题仍然存在,可能需要重新设计实验。

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此用户已注销

有帮助

qpcr内参不齐可将CT值差异较大的cDNA做不同梯度的倍比稀释进行qPCR,选择CT值差异小于2个循环的cDNA稀释倍数进行实验。一般情况下cDNA稀释一倍,CT值会增大1个循环左右,注意qPCR的正式实验时内参也要整齐呦。

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balalaLy

有帮助

内参13-15属于正常,主要还是看组内副孔的差值

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