跑qPCR，内参基因和目的基因CT值正常，结果也比较理想，但内参基因熔解曲线呈较宽的单峰，Tm比目的基因熔解曲线低很多，有效吗？

看图，感觉两个melt curve 底边是一样宽的，但是你如果觉得内参基因的宽，可以考虑换一个大家常用的内参基因试试，一般情况，内参基因不会出现这种问题。

这可能存在大小相近的非特异性产物，可以利用高分辨率琼脂糖电泳确认。

做pcr通常通过熔解曲线来判断结果的特异性，理想的熔解曲线应该是单峰，异常的熔解曲线会出现杂峰、双峰、宽峰等可能的情况。你这种情况可可能存在大小相近的非特异性产物，可以利用高分辨率琼脂糖电泳确认。