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磁珠法植物DNA提取试剂盒提取的核酸,纯度只有1.1左右,是什么原因? 应该如何调整?

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dxy_4edcldb2

核酸提取与纯化 DNA

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4 个回答

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huarenqiang5

有帮助

考虑以下原因:

(1)裂解不充分;

(2)微球分散性不好;

(3)微球吸附能力太强。

(4)磁珠吸附能力较弱;

(5)磁珠洗脱效率较弱;

(6)提取试剂(pH、盐、醇)与磁珠不匹配。 

建议按以下几点进行优化:

(1)优化试剂裂解液配方;

(2)筛选合适粒径及表面的磁珠;

(3)磁珠表面钝化处理。

(4)改变表面基团种类及密度;

(5)减少干燥时间、加热洗脱;

(6)优化试剂配方。


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loveliufudan

有帮助

可能有以下几个原因:

样品的初始质量不足或含有污染物质:在提取DNA的过程中,如果初始样品的质量过少或含有污染物质,会导致提取出来的DNA量减少,同时也会降低提取出来的DNA纯度。

操作不当:在提取DNA的过程中,如果操作不当,例如在纯化过程中没有去除污染物,或者洗涤过程中使用了错误的洗涤缓冲液,都会影响DNA的纯度。

沉淀物过多:在DNA提取的过程中,如果沉淀物过多,会影响DNA的纯度。

为了提高DNA的纯度,可以尝试以下几个方法:

加强样品质量控制:在提取DNA的前期,尽可能保证样品质量的稳定和一致性,减少污染物质的干扰。

优化提取试剂盒的使用方法:根据试剂盒的使用说明,对每个步骤进行优化和调整,确保提取过程的操作规范和纯化效果。

调整洗涤缓冲液的pH值:根据实际情况,可以适当调整洗涤缓冲液的pH值,来达到更好的纯化效果。

减少沉淀物的干扰:在DNA沉淀的过程中,可以适当调整酒精沉淀的比例和时间,减少沉淀物对DNA的干扰。

使用DNA纯化柱进一步纯化:如果还需要进一步提高DNA的纯度,可以使用商业化的DNA纯化柱进行进一步纯化。

需要注意的是,不同的植物材料可能对DNA提取的方法和条件有不同的要求,因此在实际操作中需要根据具体的样品情况进行优化和调整。

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juyue2010

有帮助

可能是组织裂解不充分,延长裂解时间

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土井挞克树

有帮助

磁珠的浓度是否不合适,磁珠过于少的话提取的核酸浓度就低

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