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包涵体复性后做凝胶阻滞实验

相关实验:聚合酶链反应构建重组 DNA

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VPN会哦路

想请教下大家,我现在研究一个植物的转录因子,想做它的蛋白互作。我在pET32a载体中插入我的目的片段,构建重组蛋白,大小70KDa左右。诱导表达后,沉淀比上清多,试了各种条件进行优化,还是以包涵体形式居多。所以我就用包涵体进行变性,纯化,再复性。用的8M尿素变性,过镍株纯化,然后用不同浓度的尿素进行透析复性,那最后,我怎么确定重组蛋白是否复性成功呢?还有就是用包涵体获得的蛋白能用来做EMSA实验吗?谢谢!

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2 个回答

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huarenqiang5

有帮助

EMSA中蛋白可以用包涵体获得。

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VPN会哦路user-title

请问你做过吗?怎么确定蛋白复性成功呀?谢谢!

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土井挞克树

有帮助

用包涵体获得的蛋白能用来做EMSA实验

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VPN会哦路user-title

请问你做过吗?可以问下怎么确定蛋白复性成功吗?谢谢

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