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腹水制备法操作简单、制备成本低,是目前国内生产抗体的主要方式,但是,得到的腹水常混有小鼠的各种杂蛋白(包括Ig),而且还有污染动物病毒的危险。
体外培养法通过转瓶培养制备的细胞培养级抗体,不但不含小鼠杂蛋白和动物病毒,而且抗体易纯化,目前在国外抗体生产中非常流行。
由于腹水中单克隆抗体的产生通常会导致内源性宿主蛋白的污染,因此细胞培养对于小规模和大规模单克隆抗体的生产至关重要。 Abnova采用独有的细胞培养法制备细胞培养级抗体,与腹水和经典细胞培养相比,该方法可提供高亲和力、高纯度且不受小鼠免疫球蛋白污染的抗体。
实验时可以根据自己的需求及2种方法的优缺点来进行选择。
毛利小五郎的徒弟
目前大量制备高亲和力单抗的方法主要有两种方法:
一种是动物体内生产法(腹水制备),在小鼠腹腔内接种杂交瘤细胞,杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体,约1-2周,可见小鼠腹部膨大,用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体;另一种是细胞体外培养法,将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养,在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。
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