质粒的制备

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

质粒的制备可以用于（1）携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体，它在基因操作中具有重要作用；（2）质粒的分离与提取是最常用、最基本的实验技术。

来源：丁香实验

操作方法

构建载体

1.取含有pUC18质粒的大肠杆菌菌液于LA培养基上37℃过夜培养；2.用无菌牙签挑取单菌落，接种于含有Amp抗生素的LB培养基中，37℃摇床——250 r/min过夜培养；3.吸取1.5 ml菌液，12000 g离心2分钟，收集菌体，倒掉菌液；吸取1.5 ml菌液，再次收集菌体，尽量将菌液倒干净；4.加入300 ml溶液 I振荡打匀，重新悬浮细胞，震荡混匀（注意：应彻底打匀沉淀或碎块）；5.加入