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研究目的基因对炎症的影响
用siRNA/质粒将目的基因敲低/过表达,lps刺激,转染24-36h后收样,PCR和ELISA结果都显示促炎因子下降(TNF-α、IL-6、IL1b、iNOS)
敲低只敲到50%,TNF-α、IL-6分别降约0.8、0.6;过表达3倍,TNF-α、IL-6分别降约0.7、0.7,二者ELISA也都下降
为什么会出现这种情况呢?两种相反的机制?如果我解释了双向的机制,算有意义吗?无论这个基因怎么变,都是抗炎,那在这个疾病模型中改变它是不是没有意义呢?
因为这个太苦恼了,拜托了解的前辈解答一下,万分感谢!
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这种情况可能是由于目的基因的不同表达水平对细胞信号通路产生了不同的影响。当敲低目的基因时,可能会降低该基因参与的某些信号通路的活性,从而导致促炎因子的下降。而当过表达目的基因时,则可能增强了该基因参与的某些信号通路的活性,从而导致促炎因子的下降。
土井挞克树
双项机制当然是有意义的,我的建议可以延长lps的刺激时间再观察结果
于小鱼鱼1998
目的基因抑制了炎性因子的表达,可能是提高了表达阈值
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